Le contexte :
La plateforme RHEM propose une gamme de prestations complète, de la prise en charge de l’échantillon à l’analyse anatomo-pathologique. Ses ingénieurs ont développé une solide expertise dans l'automatisation de la préparation des échantillons inclus en paraffine (préparation des lames). Grâce au soutien de la Région Occitanie, de l’Europe à travers le fond FEDER et d'IBiSA, le plateau RHEM situé dans les locaux de l’IRCM a acquis en mars 2018 un automate d’immunomarquage et d’hybridation in situ : le Discovery Ultra de Ventana Roche.
L'équipement :
Ce nouvel automate permet de réaliser des marquages immunohistochimiques et immunofluorescents en simple ou multimarquages et de l’hybridation in situ. Les avantages de cet automate sont :
- 30 tiroirs indépendants les uns des autres. Ainsi, on peut faire, lors d’un même cycle, autant de protocoles différents que de lames, soit au maximum 30 protocoles différents sur 1 lame chacun.
- Une répartition homogène des réactifs sur la lame assurant une meilleure homogénéité de marquage, grâce à des flux d’air pulsés régulièrement.
- La possibilité de faire des dépôts des anticorps et des sondes de façon automatisée mais aussi manuelle, ce qui permet de limiter les volumes-morts de réactifs lors des mises au point.
- Le dépôt d’un faible volume d’anticorps et de sondes (100 µL/lame), limitant le coùt de la réaction
- Le contrôle de la température d’incubation des anticorps à 37°C.
- Une « ouverture » complète de l’automate, ce qui permet d’utiliser des kits de toutes marques.
- Une traçabilité asurant l’enregistrement de toutes les conditions réalisées sur vos lames.
Avec cet équipement, nous disposons des derniers développements technologiques en immunohistochimie et immunofluorescence, ce qui permet de réaliser des multimarquages en visible et en fluorescence même avec des anticorps primaires issus d’une même espèce.
Applications :
Les services proposés avec cet automate sont les suivants :
- la réalisation de marquages déjà validés sur l’automate :
- marqueurs de cellules inflammatoires : CD3e, PAX5, CD45,
- marqueurs de cellules en prolifération ou apoptose : Ki67, Casp3 activée,
- marqueurs de vaisseaux sanguins et lymphatiques : CD31, LYVE-1,
- marqueurs de cassures de l’ADN : gH2AX,
- tag ou gènes rapporteurs : GFP,
- suppresseurs de tumeurs : P53,
- marqueurs de cellules humaines : sonde ALU, surface of intact mitochondria, etc…
- la mise au point de l'automatisation de nouveaux immunomarquages, à la demande d'un chercheur ou du comité de pilotage du plateau.
Les nouveaux immunomarquages proposés seront diffusés sur le site de RHEM ou à travers la lettre d'information de Biocampus.
Le travail de développement de nouveaux marqueurs sera réalisé par une ingénieure d’étude contractuelle, Yaël Glasson, financée par la Région et l’Europe.
Contacts :
Cette adresse e-mail est protégée contre les robots spammeurs. Vous devez activer le JavaScript pour la visualiser. & Cette adresse e-mail est protégée contre les robots spammeurs. Vous devez activer le JavaScript pour la visualiser. (responsable plateau),
